原位雜交是在分子生物學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用極為廣泛的實驗技術(shù)之一，是在研究生物體發(fā)育過程中的一種極為重要的分子遺傳學(xué)的研究方法。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，在分子病理和科學(xué)研究方面得到了日益廣泛的推廣和應(yīng)用。在原位雜交和FISH實驗中，變性溫度是至關(guān)重要的環(huán)節(jié)，也是確保實驗成功的關(guān)鍵步驟。原位雜交儀可以根據(jù)實驗者的設(shè)置，自動完成變性和雜交過程。嚴(yán)格的溫度控制，適宜的濕度環(huán)境，加上低廉的成本，和時間上的節(jié)省，為分子水平的研究提供了可靠的保證。
原位雜交主要是基于以下這個主要原理：單鏈的DNA或者RNA只要他們的序列是互補(bǔ)的，即符合AT，CG的堿基配對原則，那么這樣的兩條核酸鏈之間（DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA）就可以形成一個穩(wěn)定的雜交復(fù)合體。這一原理對于檢測一個特異的mRNA在某一種生物體，或者某些組織切片、單個細(xì)胞里具體表達(dá)位置非常有用。該技術(shù)zui早應(yīng)用于60年代末期，由于核酸分子雜交的特異性高，因此該技術(shù)已被廣泛應(yīng)用，例如與細(xì)胞內(nèi)RNA進(jìn)行雜交以觀察該組織細(xì)胞中特定基因表達(dá)水平。
熒光原位雜交則是在放射性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非放射性分子細(xì)胞遺傳技術(shù)，以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記的原位雜交方法，是利用熒光標(biāo)記的DNA探針來檢測在細(xì)胞、組織和腫瘤的特定DNA序列的分子診斷技術(shù)。首先將樣本DNA變性，加入特定的熒光標(biāo)記的探針與變性的樣本混合進(jìn)行雜交，退火得到雙鏈DNA。探針信號能夠被熒光顯微鏡捕獲，從而定性、定量地檢測目標(biāo)DNA。與其它用于研究染色體的技術(shù)不同，F(xiàn)ISH操作靈活，不需要在正在分裂的細(xì)胞進(jìn)行檢測，因而能夠用來檢測基因或染色體是否異常，通常用于遺傳咨詢，醫(yī)學(xué)和品種鑒定、DNA特定功能研究。利用FISH方法還可檢測非整倍體，微缺失綜合征以及基因重排等，這些指標(biāo)對遺傳性疾病，如白血病，淋巴瘤，實體瘤，自閉癥等發(fā)育綜合征有重要的臨床意義。
